Дәрілерді сынауды метрологиялық қамтамасыз ету

 

Бір капсулдағы белсенді

Заттардың мөлшері, мг

Тегафур                                                                       400 . 0 СП. фирма

Қосымша заттар

Стеарик қышқылы                                                     4. 0               ЕФ*

Капсул құрамының  шамасы                                 404.0

Капсула

Сыртқы қабатының  құрамы:

Диоксид титаны ( Е 171 )                                       2%            ЕФ*

Сары хинолин ( Е 104)                                        0,7139 %      95/45/ЕС**

Қызыл темір ( III) оксиді (Е 172)                        0,0057%       ФСМА НФ**

Желатин                                                                100 % -ға дейін      ЕФ*

 

Қақпақша қабығының  құрамы:

Диоксид титаны ( Е 171 )                                       2,5%              ЕФ*

Сары хинолин ( Е 104)                                          0,1586 %      95/45/ЕС**

Пунцті 4R ( Е 124)                                                  0,1983 %      95/45/ЕС**

Желатин                                                                  100 %  -ға       ЕФ*

                                                                                      дейін

 

* - әрекет етуші баспа.

 

** - комиссия диррективі ( 95/45/ЕС).

 

*** - Фармакопия АҚШ,  Ұлттық формулалар ( ФША НФ), әрекет етуші

баспа.

Тегафур

N¹ – ( 2' –фуранидил) – 5 – фторурацил

C₈H₉FN₂O₃                                                                       M_r200.17

Сипаттама. Қатты желатинді капсулдар. Капсулдардың беті сары түсті, қақпақшасы қою сары түсті. Капсулдардың құрамы – иіссіз  ақ түсті, ұнтақ.

Сыртқы түрі ГФ ҚР I, т.1 талаптарына, “Капсулдар” жалпы бабына сәйкес келеді.

Идентификация: Сынақ ультракүлгін және көрінетін облыстарда ( ГФ ҚР I, т.1, 2.2.25) спектрофотометрия әдісімен жүргізілді.

Сандық мөлшерін анықтау үшін дайындалған сыналатын ерітіндінің ультракүлгін спектрі 235 нм- 350 нм аралығында, толқын ұзындығы ( 270 ± 2) нм болғанда максимум және ( 248 ± 2) нм болғанда минимум жұтуға ие болу керек.

λ	0	λ	0	λ	0	λ	0
235	0.44	262	0.45	298	0.45	333	0.43
242	0.42	270max	0.50	307	0.48	340	0.45
247min	0.39	280	0.48	315	0.47	350	0.46
254	0.42	290	0.47	325	0.44	-	-

 

200мг капсул құрамын  30% натрий гидроксидінің ерітіндісінің  10мл-не еріткен, 200мг Р мырыш  ұнтағын қосқан және қыздырған.  Бөлінген аммиакты ылғал Р қызыл лакмус қағаздың көк түске бояулынан анықтаған.Ескерту. 30% натрий гидроксидінің ерітіндісін дайындау. 30 г.Р натрий гидроксидін Р суда ерілген, сол ерітіндімен 100 мл-ге дейін жеткізген және араластырған. Процесс қорытындысының талаптарға сәйкес келетіндігі анықталды.

Капсул құрамының орташа шамасы мен шаманың біртектілігі. Орташа шамасы 374- 434мг аралығында.

20 капсулдың ішінде  тек 2-і ғана құрамының  орташа  шамасынан ±7,5% асатын ауытқуларға  ие бола алады, алайда ешбіреуі  орташа шамадан ± 15% артық ауытқымау керек (ГФ ҚР I, т.1, 2,9,5).

1. 0,4011                                   11. 0,3987
2. 0,4002                                   12. 0,3893
3. 0,3997                                   13. 0,400
4. 0,3964                                   14. 0,3964
5. 0,3962                                   15. 0,3991
6. 0,3978                                   16. 0,3957
7. 0,3970                                   17. 0,4016
8. 0,4010                                   18. 0,4006
9. 0,3963                                   19. 0,3994
10. 0,3915                                   20. 0,3989

Орташа: 7,9569: 20 = 0,397845г = 397,845 мг

+0,94 %; - 2,14 %

Процесс қорытындысының талаптарға сәйкес келетіндігі анықталды.

Үгітілетіндігі. Дисктерді  қолдана отырып Р суда 15 минн артық емес (ГФ ҚР I, т.1, 2,9,1).

1) 10 мин   2) 10мин   3) 10,5 мин   4) 11мин   5) 11 мин   6) 12мин

Орт: 10-нан 12 мин-қа дейін (10,75мин).

Ерігіштігі: Сынақ, қалақшасы  бар құралды пайдалана отырып, ГФ ҚР I, т.1, 2,9,3 талаптарына сәйкес жүргізіледі. Араластырғыштың айналу жылдамдығы 100 айн/мин, еру ортасы- 900 мл. 0,1М хлор сутекті қышқыл, еру уақыты 45 мин, температурасы – (37,0 ± 0,5) ºС.

Сынау үшін, 1 капсуланы  ерітуге арналған  ыдысқа орналастырған. 45 мин-н кейін  50 мл-н алып, формаларының өлшемі 3.0 мкм-ден аспайтын  мембранды сүзгіш арқылы  сүзген. Алғашқы 2 мл фильтратты  шығарып тастаған.

2.0 мл алынған фильтратты  көлемі 50мл өлшеуіш колбаға орналастырып, 0,1М хлор сутек қышқылы ерітіндісінің   көлемін белгіге дейін жеткізген және араластырған (сыналатын ерітінді).

Сыналатын ерітіндінің оптикалық  тығыздығы толқын ұзындығы ( 270± 2) нм болғанда, компенциялық ерітінді ретінде  0,1М хлор сутек қышқылын пайдалана отырып, қалыңдығы 10 мл кюветте спектрофотомертмен өлшеген. Сол уақытта, салыстыру ерітіндісінің оптикалық тығыздығын өлшеген. 45 мин-та ерітіндіге айналған тегафурдың (х) пайыздық мөлшерін, келесі формуламен есептеген:

 

 

мұндағы, Д₁ –сыналатын ерітіндінің оптикалық тығыздығы; Д₀ – салыстыру ерітіндісінің оптикалық тығыздығы; m₀ – СО тегафурдың өлшенген шамасы, мг; Р – СО тегафурдағы, тегафурдың мөлшері, %; а – “ Бір капсулдың құрамы” бөлімінде көрсетілген тегафурдың құрамы. 45 минутта еру ортасына көшкен тегафурдың мөлшері “Бір капсулдың құрамы” бөлігінде көрсетілгеннен 75 % - дан кем болмау керек (Q). Ескерту. 0,1 М хлор сутек қышқылын дайындау, 103,0 г хлор сутек қышқылын Р, сумен 1000 мл көлемге дейін жеткізген және араластырған ( 1М). 100.0 мл 1М хлор сутек қышқылын сумен Р 1000 мл көлемге дейін жеткізген және араластырған ( 0,1 М). Салыстыру ерітіндісін дайындау.100,0 мг тегафурды ( СО СП фирма) көлемі 100 мл өлшеуіш колбаға орналастырған, 0,1М хлор сутек қышқылында еріткен, ерітінді көлемін сол еріткішпен белгіге дейін жеткізіп, араластырған. Ерітіндіні дайындалған бойда пайдаланған.

M _б.п = 8.2223                     а = 400 мг                        Д₁= 0,60

М_б.с.нав = 8.3228                  Р = 99,8 %                        Д₀ = 0,42

М _нав = 0,1005

 

 

Процесс қорытындысының талаптарға сәйкес келетіндігі анықталды.

Кептіру кезінде шама шығындары. Сынау ГФ ҚР I,т.1,22,32 талаптарына сәйкес жүргізді.

1.000 г капсул мөлшерін ( 103 ± 2) ºС температурада тұрақты  шамаға дейін кептірген.

Шама шығыны 1,0 % - дан  аспау керек.

M _б.п = 7,8133                     п/выс.             М_б.с.нав = 8,8092

М_б.с.нав = 8,8134                                          М_б.с.нав = 8,8088

М _нав = 1,0011

 

 

Процесс қорытындысының талаптарға сәйкес келетіндігі анықталды.

Ұқсас қоспалар: Сынау  жұқа қабатты  хроматография ( ГФ ҚР I, т.1, 2.2.27) әдісімен жүргізіледі.

100.0 мг капсул мөлшеріне 10 мл  метанол Р қақан, араластырған, алғашқы 2 мл фильтратты (сыналатын ерітінді) шығара отырып, құрғақ колбаға құрғақ қағаз сүзгіш арқылы сүзген.

Силуфол хроматографиялық пластинкалық мәре сызығына өлшемдері 10 х 15 см болатын үш нүкте енгізген.

1 нүкте- сыналатын ерітінінің 10 мкл (100 мкг);

2 нүкте- салыстыру ерітіндісінің 5 мкл (0,1 мкг);

3 нүкте- салыстыру ерітіндісінің 2,5 мкл (0,05 мкг).

Пластинканы  ауада 5 мин  ішінде кептірген, одан кейін толуол Р- ацетон Р (5:4) еріткіштер жүйесімен  камераға орналастырған және шығатын әдіспен хроматографиялаған. Еріткіштер фронты мәре сызығынан 10 см өткенде пластинканы камерадан шығарған, 15 мин ішінде ауада кептірген және толқын ұзындығы 254 нм болғанда ультракүлгін жарықта қараған.

Сыналатын ерітіндінің  хроматограммасында, шикі дақтан басқа, әрбіреуінің шамасы Rf (5- фторурацил үшін 0,3 жуық және N1 – (2- фуранидил) – урацил үшін 0,4-ге жуық) болып келетін, қосымша дақтар анықталғаг және бояу интенсивтілігі салыстыру ерітіндісінің хроматограммасында дақтан (0,1 мкг) аспаған 2-нүкте) , қоспаның 0,1% -нан артық емес.

“ Хроматографиялық жүйенің жарамдылығын тексеру” тестісі өткізген.

Ескерту. Салыстыру ерітіндісін  дайындау. 1,0 мл сыналатын ерітіндінің көлемі 100мл өлшеу колбасына орналастырған, ерітінді көлемін  Р метанолмен белгіге дейін жеткізген және араластырған 20.0мл дайындалған ерітіндіні көлемі 100 мл өлшеу колбасына орналастырған, ерітінді көлемі метанолмен Р белгіге дейін жеткізген және араластырған. Ерітіндіні дайын күйінде пайдаланылған. Хроматографиялық жүйенің жарамдылығын тексеру. Хроматографиялық жүйе жарамды, себебі салыстыру ерітіндісінің хроматограммасында (0,05 мкг) дақ көрініп тұр (3-нүкте).

Процесс қорытындысының талаптарға сәйкес келетіндігі анықталды.

Микробиологиялық тазалық. Сынау , ГФ ҚР I, т.1, 2.6.12, ГФ ҚР I, т.2, 2.6.13 талаптарына сәйкес жүргізіледі.

Препарат  ГФ ҚР I, т.1, 5.1.4, 3А категориясы талаптарына сәйкес келу керек.

Препарат, сынау жағдайында антимикробтық әрекетке ие болады. 1:100 қосу қолданылады.

1г препаратта 1000 бактериялар және 100 ашытқы және көкшіл саңырауқұлақтарды ( жалпы ) болуына рұқсат беріледі.

1г препаратта  Esherichia coli  болуына рұқсат берілмейді.

Микробиологиялық тазалыққа  сынау екі қабатты агарлы әдіспен  жүргізіледі.

Үлгі ерітіндісін дайындау: 10г зерттелетін затты 100 мл рН 7,0 фосфатты ерітіндіге еріткен. Бұл ерітіндіні жалпы микроб санын, ашытқы және көкшіл саңырауқұлақтар санын анықтауда қолданған.

Бактериялардың жалпы  санын анықтау. Зерттелетін препарат үлгісінің дайындалған ерітіндісін 1 мл-ден 2 пробирканың әрбіреуіне N 1 ортаның 45 ºC кем емес температураға дейін 4 мл балқыған және суытылған түрінде енгізген. Тез араластырған, ішінде 20 мл суыған тағамдық N 1 орта бар Петри стаканына аударды. Тез, Петри стаканын араластырып, агардың жоғарғы қабатын бірқалыпты бөлген. Орта суып болғаннан кейін, стакандарды төңкерген және 5 тәулік ішінде 35 ºC температурада термостатта инкубацияланған. 48 сағаттан кейін және ақырғы 5 тәуліктен кейін Петри стакандарындағы аэробты бактериялар бағандарының саны 130-дан аспады. Процесс қорытындысының талаптарға сәйкес келетіндігі анықталды.

Ашытқы және көкшіл саңырауқұлақтардың жалпы санын анықтау. Сынау бактериялардың жалпы санын, анықтауға ұқсас жүргізілді, алайда N² орта қолданылады. Егіндерді 5 тәулік ішінде 22 ºС температурада термостата инкубацияланған. 2 сағаттан және ақырғы 5 тәуліктен кейін ашытқы және көкшіл саңырауқұлақтар бағананың саны 60-тан аспау керек. Процесс қорытындысының талаптарға сәйкес келетіндігі анықталды.

Esherichia coli  анықтауға  арналған сынау. Препараттың 10 г-н 100 мл № 11 қоректену ортасына 10 мл-н N 3 ортаның 100 мл-не ауыстырған, араластырған және 24 сағат ішінде 35 ºС  температурада инкубациялаған. Инкубация мерзімі аяқталған соң, эндо ортасында сипатты бағандардың өнімі анықталмады. Процесс қорытындысының талаптарға сәйкес келетіндігі анықталды.

Сандық мөлшерін анықтау. Анықтау, ультракүлгін және көрінетін облыстарда (ГФ ҚР I, т.1 , 2.2.25) спектрофотометрия әдісімен жүргізді.

Капсул құрамының 200.0 мг- н көлемі 200мл өлшеуіш колбаға орналастырды, 100 мл 0,01М натрий гидроксидінің ерітіндісін  қосып, ерітті ерітіндінің көлемін 0,01М натрий гидроксидінің ерітіндісімен белгіге дейін жеткізіп және араластырды. Алынған ерітіндіні қағаз сүзгіш арқылы сүзсек, алғашқы 20 мл фильтратты шығарып тастаған.

2.0 мл фильтратты көлемі 100 мл өлшеуіш колбаға ауыстырған, ерітінді көлемін 0.01М натрий гидроксидінің ерітіндісімен белгігіе дейін жеткізген және араластырған (сыналатын ерітінді ).

Сыналатын ерітіндінің  оптикалық  тығыздығын, компенсациялық ерітінді ретінде 0.01М натрий гидроксидінің ерітіндісін пайдалана отырып, қабатының қалыңдығы 10мм кюветте, толқын ұзындығы (270 ±2) км болатын спектрофотометрде өлшеген.

Сол уақытта, салыстыру  ерітіндісінің оптикалық тығыздығын өлшеді.

Капсул құрамындағы тегафурдың пайыздық мөлшерін келесі формуламен есептеген:

 

 

мұндағы Д₁ – сыналатын ерітіндінің оптикалық тығыздығы;Д₀ – салыстыру ерітіндісінің оптикалық тығыздығы;m ₀ – СО тегафур мөлшерінің массасы; m ₁ – капсул құрамындағылардың мөлшерінің шамасы, мг; Р – СО тегафурдағы тегафурдың мөлшері, пайызы; в- капсул құрамының орташа шамасы, мг; а- “Бір капсулдың құрамы” бөлімінде келтірілген тегафурдың мөлшері, мг;

Бір капсулдағы тегафурдың мөлшері “Бір капсулдың құрамы” бөлімінде көрсетілгеннен 95,0% – 105,0 % аралығында болу керек.

Ескерту. 0,01М натрий гидроксидінің  ерітіндісін дайындау.

42г Р натрий гидроксидін Р суда еріткен, ерітіндінің көлемін сол ерітіндімен 1000 мл-ге дейін жеткізген және араластырған (1М ерітінді). 10.0 мл 1М ерітіндіні Р сумен 1000 мл көлемге дейін жеткізген және араластырған (0,01М ерітінді). Салыстыру ерітіндісін дайындау. 200.0 тегафурды (СОСП фирма) көлемі 200мл өлшеуіш колбаға орналастырған , 0.01 натрий гидроксидінің ерітіндісіне еріткен, ерітінді көлемін сол ерітіндімен белгіге дейін жеткізген және араластырған. 2.0 мл алынған ерітіндіні көлемі, 100 мл өлшеуіш колбаға ауыстырды, ерітінді көлемін 0,01 М натрий гидроксидінің ерітіндісімен белгіге дейін жеткізді және араластырды.