Исследование крови

    Отдельно  взятый человек по каждой из имеющихся  систем обязательно относится к какой-либо группе. Например, по АВО - ко второй группе, по MNSs - к пятой, по системе Le - к третьей, и так далее.

    Принято считать, что подавляющее количество групп разных систем проявляются у людей совершенно независимо друг от друга. То есть, если у человека по системе АВО вторая группа, то у него по другим системам может быть любая группа. С учетом этого положения, увеличение числа исследованных систем уменьшает частоту встречаемости набора групп крови. Исследовав кровь, например по десяти системам, можно получить свыше 300 тысяч комбинаций, таким образом одна конкретная комбинация групп может встретиться у одного из 300 тысяч человек. Естественно, приведенные цифры условны и для разных сочетаний систем и групп будут отличаться, однако они наглядно демонстрируют, как с увеличением количества исследуемых систем антигенов возрастают возможности дифференциации происхождения биологических объектов (в первую очередь крови) от разных индивидуумов.

    Рассмотрим  судебно-медицинские возможности  исследования некоторых систем антигенов  применительно к пятнам крови.

    Группы  крови эритроцитарных систем

    В судебно-медицинской практике в  целях установления групповой принадлежности крови наиболее часто проводят исследование нескольких эритроцитарных систем.

    1. Система АВО. В ней выделяют  четыре основные группы: первая (1) группа характеризуется наличием  в эритроцитах антигена О, а  в плазме крови антител альфа  (и) и бета (Р); вторая (II) - наличием  в эритроцитах антигена А, в  плазме антитела бета; третья (III) - наличием в эритроцитах антигена В, в плазме антитела альфа; четвертая (IV) - наличием в эритроцитах антигенов А и В и отсутствием в плазме антител альфа и бета. Частота встречаемости этих групп примерно составляет: 1 - 35%; II - 35%; III - 20%; IV - 10%.

    Кроме того, установлено, что в эритроцитах  большинства людей со второй, третьей и четвертой группой содержится антиген Н, сходный по своим свойствам с антигеном О. Поэтому систему АВО называют еще АВО (Н). Обнаружена особенность антигена А у разных людей, этот антиген может проявляться в разного рода реакциях сильно и слабо. Обнаружение этих дополнительных особенностей значительно расширило возможности дифференцирования объектов по системе АВО.

    Для отнесения крови к той или  иной группе чаще производят обнаружение  антигенов, а не антител, потому что  антигены значительно более устойчивы  к внешним воздействиям, что важно  для объектов судебно-медицинской  экспертизы. Известны случаи обнаружения антигенов системы АВО в тканях, хранившихся сотни и даже тысячи лет, например в литературе отмечается, что были установлены группы крови некоторых мумий египетских фараонов. Но проводятся исследования и на наличие антител альфа и бета.

    Методы  выявления антигенов системы  АВО основаны на их способности абсорбировать антитела альфа и бета. Разработано несколько методик проведения таких исследований, наиболее применяемые: количественный метод абсорбции агглютининов: метод абсорбцииэлюции и метод смешанной агглютинации. Каждый из них имеет свои достоинства и недостатки, например количественный метод абсорбции агглютининов недостаточно чувствителен, но позволяет избежать влияния загрязнений, методы абсорбции-элюции и смешанной агглютинации при определенных неточностях в выполнении методики могут привести к экспертным ошибкам, но зато очень чувствительны и могут быть использованы при очень малом количестве исследуемого вещества.

    Отмеченными выше недостатками не обладает реакция  иммунофлюоресценции (РИФ). Она позволяет  точно определить видовую и групповую  принадлежность даже отдельной клетки. Суть этой методики в том, что антитела, меченные различными флюорохромами, вступают в контакт с антигенами, расположенными на поверхности объектов исследования, например на внешней оболочке сперматозоида. После удаления не прореагировавших антител остаются только соединившиеся с антигенами. При микроскопическом изучении объектов исследования в ультрафиолетовом свете наблюдается свечение в тех местах, где расположены искомые антигены. Таким образом, определяется не только наличие антигенов, но и их расположение на объекте.

    В результате исследования объекта (объектов) эксперт-биолог обнаруживает или не обнаруживает в нем те или иные антигены и антитела. Если характер объекта таков, что эксперт точно уверен в его происхождении от одного человека, то по выявленному набору антигенов и антител он точно устанавливает, что объект относится к такой-то группе системы АВО. Установив группу, специалист сравнивает ее с группой крови потерпевшего и подозреваемого. При несовпадении групп эксперт делает вывод, что кровь не произошла от данного конкретного лица. При совпадении - делается вывод, что кровь могла произойти от конкретного человека.

    Если  эксперт не может быть уверен, что  объект исследования образован кровью только одного лица, то сделать конкретный вывод об исключении или не исключении происхождения пятна крови от конкретного лица он не может. Например, при обнаружении в пятне крови  антигена В, при неисключении смешивания крови, эксперт сделает вывод, что  пятно могло быть образовано или  кровью третей группы или кровью третей группы в смеси с кровью первой. На основании такого результата в качестве источника крови в данном пятне будут исключены лица со второй и четвертой группой и не исключены лица с первой и третьей.

    Исходную  информацию, для решения вопроса  о возможном смешивании крови  в исследуемом пятне, эксперт  берет из протокола осмотра места  происшествия и из других источников.

    2. Система MNSs. В ней выделяются  девять групп: MNSs, MNs, Ns, Mss, Ms, MS, NSs, MNS и  Ns. Система весьма информативна  для дифференцирования объектов. Однако, выявление изоантигенов  этой системы более сложно  чем системы АВО, кроме того  они менее устойчивы во времени.

    Принципы  выявления антигенов этой системы  такие же как для системы АВО.

    3. Система резус Rh. Около 85% людей  являются резус-положительными, 15% - резус-отрицательными. Система резус  включает семь изоантигенов: D, С,  С ,Е, d, с, е. В крови резус-положительных  людей содержится хотя бы один  из указанных антигенов. Возможные  сочетания антигенов этой системы  могут составить около ста  различающихся групп. Антигены  системы резус достаточно хорошо  устанавливаются в жидкой крови  и плохо в пятнах из-за низкой  устойчивости, поэтому их исследование  в судебной медицине ограничено.

    4. Система Р. Антиген Р присутствует  в крови примерно 70-80% европейского населения. По силе выраженности он может быть сильным, умеренным и слабым. Этот антиген имеет невысокую устойчивость во внешней среде. Если в пятне крови не выявляется антиген Р, то это может означать или то, что его там нет, или то, что он разрушился от действия внешних факторов, поэтому экспертное значение имеет только факт выявления этого антигена.

    Возможности исследований по системе Р еще  далеко не исчерпаны. Установлено, что  антиген этой группы может иметь  несколько  разновид-

    ностей, в дальнейшем в повседневную судебно-медицинскую  практику может быть внедрено определение  примерно десяти групп по этой системе.

    Кроме указанных систем в эритроцитах, могут быть определены в практических целях: система Льюис (Le); система Келл-Челлано (К); система Лютеран (Lu); система Даффи (Fy); система Кидд (lk).

    Приведенный перечень эритроцитарных систем на этом не ограничивается, в него вошли  только наиболее изученные в судебно-медицинском  плане системы антигенов.

    Исследование  сывороточных систем

    В плазме (сыворотке) крови человека содержится большое количество белков и липопротеидов. Кроме прочих различий, они отличаются друг от друга по антигенным свойствам. Системы плазмы крови, так же как  и эритроцитарные, передаются по наследству и не связаны между собой. Их используют в судебно-медицинской практике с теми же целями, что и эритроцитарные.

    Наиболее  изучены и распространены на практике следующие из них:

    1. Система гаптоглобина (Нр).

    Гаптоглобин особый белок плазмы крови, относящийся  к глобулинам. Выделяются три группы крови по гаптоглобину: Нр1-1, частота встречаемости 15%; Нр1-2, встречаемость 50%; Нр2-2, встречаемость 35%.

    Разновидности гаптоглобина имеют разный молекулярный вес, поэтому могут быть обнаружены методом электрофореза в геле.

    На  результат выявления гаптоглобинов  влияют разные факторы, но наибольшее негативное воздействие оказывает характер следонесущей поверхности, получение результатов осложняется, если кровь находится на впитывающей поверхности.

    2. Системы иммуноглобулинов.

    Система Gm. В эту систему входят 23 варианта антигенов. Они обусловливают возможность разделения крови по этой системе на большое количество групп. Антигены этой системы хорошо сохраняются в пятнах крови.

    Система Кт. Использование этой системы дает хорошие результаты в исключении отцовства.

    Изучены и имеют определенное судебно-медицинское  значение еще несколько систем плазмы крови.

    Изоферментные системы

    В организме человека, в крови и  других тканях, функционируют многочисленные ферменты. Они, так же как и описанные выше биологические компоненты тканей, проявляют антигенные свойства, передаваемые по наследству. В судебно-медицинской практике нашли применение несколько ферментных систем: система фосфоглюкомутазы (ФГМ); система эритроцитарной кислой фосфотазы (КФЭ); система эстеразы (ЭсД); система аденилаткиназы (АК); система фосфоглюконатдегидрогеназы (ФГД) и др.

    Разделение  ферментных систем на группы производится с помощью различных модификаций электрофореза, основанного на том, что разные по весу молекулы или их части неодинаково передвигаются в геле под действием электрического тока.

    Деление на группы по ферментным системам используется в судебной медицине для работы с жидкой кровью, дифференциации пятен крови и других биологических объектов.

    Судебно-медицинское  исследование жидкой крови

    В правоохранительной деятельности необходимость  сравнительного исследования жидкой крови возникает значительно реже, чем необходимость сравнения сухой крови с сухой или сухой с жидкой. Большая часть таких случаев связана с установлением отцовства и материнства, т.е. факта происхождения ребенка от конкретных женщины и мужчины.

    Для этих целей используют законы наследования свойств эритроцитарных, сывороточных, изоферментных и лейкоцитарных  систем.

    Основное  правило, на котором базируется метод  установления отцовства и материнства, гласит, что в крови ребенка  могут быть антигены только с такими свойствами, которые есть у родителей.

    При исследовании указанных систем категорическим может быть только исключающий вывод  об отцовстве (материнстве). Положительный  вывод может быть только вероятностным, как бы не была мала вероятность  ошибки. То есть, при совпадении свойств  крови ребенка, матери и предполагаемого отца назвать мужчину отцом, со 100% гарантией, невозможно.

    Для такого судебно-медицинского исследования берут кровь у ребенка, матери и предполагаемого отца. Их кровь  исследуют параллельно на предмет  установления групп по различным  системам, а затем, используя таблицы, в которые занесены закономерности наследования групп крови по системам, исключают или не исключают отцовство  предполагаемого отца.

    Рассмотрим  сказанное на примере групп крови  по системе АВО.

    Допустим, у ребенка установлена первая группа, антигены А и В отсутствуют, а у матери вторая группа, в ее крови имеется антиген А.

    При таком варианте исключается, что  отцом может быть мужчины с  четвертой группой АВ, но не исключается отцовство мужчин с первой, второй и третьей группой. Если у ребенка установлена третья группа (антиген В) и у матери третья группа, то отцовство не исключается для мужчины с любой группой крови. И так далее для различных сочетаний групп.

    Такого  рода экспертизы и исследования на предмет установления отцовства и материнства в настоящее время еще проводятся. Они дают быстрый и конкретный результат по исключению отцовства. Однако, как уже говорилось, такие исследования не обеспечивают категорический положительный вывод об отцовстве и материнстве. В настоящее время для решения этой задачи все шире и шире применяется метод генотипоскопии. Закономерности наследования строения молекулы ДНК дают основания для гарантированного категорического положительного или отрицательного вывода по этому вопросы.

    Заключительная  часть.

    Каждый  случай проведения судебно-медицинского исследования должен быть надлежащим образом документирован, при чем  по форме, предусмотренной законом. Во всех случаях проведения судебно-медицинской  экспертизы составляется заключение (акт). Если исследование производится на основании  постановления следственных органов  о назначении экспертизы, то составляемый экспертном отчет называется заключением.