Современное состояние исследований фармакологической активности лекарственных растений

В результате исследования для всех исследуемых извлечений из надземной части зеленчука желтого было установлено наличие анальгезирующей активности в тестах «ватной гранулемы», «уксуснокислой корчи» и «tail-flick». Наиболее выраженное действие, сопоставимое с действием метамизола натрия, проявлял водный экстракт. Изучение противовоспалительной активности на модели «ватной гранулемы» экстрактов показало, что все они обладают способностью снижать образование грануляционной ткани на- 48 %. А антиэкссудативное действие проявляет только 70%-ный спиртовый эстракт из надземной части Зеленчука желтого. [14]

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Глава 3.Изучение противовирусной и антирадикальной активностей.

3.1. Изучение противовирусной активности стевии.

Исследования описаны в сатье «Противовирусная активность сухого экстракта стевии». Изучали: С. А. Кедик, Е. И. Ярцев, И. Е Станишевская.

Из листьев стевии получали сухой экстракт. Для оценки биологической активности сухого очищенного экстракта, были проведены испытания антивирусного действия. Испытания проводили с РНК-содержащим вирусом болезни Тешена (Porcine teschovirus) и ДНК-содержащим вирусом инфекционного ринотрахеита (Bovine herpesvirus 1). Исследования проводились также в отношении РНК-содержащего человеческого коронавируса (Human coronavirus (HcoV-229E)).

После проведенных исследований установлено, что сухой очищенный экстракт, полученный из листьев стевии, в дозе 2000 мкг/мл ингибирует репродукцию вируса болезни Тешена на 0,5 Ig ТЦД₅₀, инфекционного ринотрахеита- на 0,25 Ig₅₀ и коронавируса- на 0,33 Ig ТЦД₅₀.

Сухой очищенный экстракт в дозе 4000 мкг/мл инактивирует вирусы болезни  Тешена на 0,75 Ig ТЦЦ₅₀, инфекционного ринотрахеита- на 0,5 Ig ТЦД₅₀ и коронавирус- на 0,66 Ig ТЦД₅₀.

Известно, что часто используемый антивирусный препарат ремантадин обладает высоким вирусстатическим действием, но практически не проявляет вирулицидное действие, то есть не подавляет вирус в межклеточном пространстве и кровяном русле. В отличие от ремантадина, растворы сухого очищенного экстракта стевии обладают выраженными вирусстатическими и вирулицидными свойствами. До последнего времени сухие экстракты стевии (стевиозиды) рассматривались преимущественно как подсластитель. Подтверждение антивирусных свойств экстракта стевии делает его привлекательным для дальнейшего исследования в качестве потенциального лекарственного средства. [9]

3.2. Изучение антирадикальной активности экстрактов растений: пижмы обыкновенной, тысячелистника обыкновенного, полыни обыкновенной, зверобоя продырявленного, клевера лугового.

Пижма обыкновенная- Tanacetum vulgare, семейство астровые- Asteraceae (Рис.11). Многолетнее травянистое растение с горизонтальным ползучим деревянистым корневищем и тонкими мочковатыми корнями. Стебли многочисленные, высота 30- 150 см, прямые. Листья очередные. Пижму обыкновенную применяют как желчегонное и спазмолитическое средство. [15, 29]

Рис. 11. Пижма обыкновенная

Тысячелистник обыкновенный- Achillea millefolium, семейство астровые- Asteraceae (Рис.12). Многолетнее травянистое растение с тонкими ползучими корневищами. Цветоносные неветвистые стебли с розетками прикорневых листьев. Применяется как кровоостанавливающее средство, главным образом при маточных кровотечениях на почве воспалительных процессов. [15, 30]

Рис. 12. Тысячелистник обыкновенный

Полынь обыкновенная- Artemisia vulgaris, семейство астровые- Asteraceae (Рис.13). Моголетнее травянистое растение с сильно ветвящимся главным корнем и вертикальным крепким многоглавым корневищем. Стебли прямостоячие, листья очередные. Применяют как успокаивающее, противосудорожное и кровоостанавливающее средство. [15, 31]

Рис. 13. Полынь обыкновенная

Клевер луговой- Trifolium pratense, семейство бобовые- Fabaceae (Рис.14). Многолетнее травянистое растение, высотой 20- 50 см. Корень стержневой, ветвистый. Цветки расположены в головчатых соцветиях. Плод- яйцевидный боб. Применяют как отхаркивающее, мочегонное, желчегонное, потогонное, противовоспалительное, антитоксическое, кровоостанавливающее, ранозаживляющее, болеутоляющее и противоопухолевое средство. [11, 32]

Рис. 14. Клевер луговой

Исследования проводили: В. А. Волков, Н. А. Дорофеева, П. М. Пахомов. Результаты описаны в статье «Кинетические методы анализа антирадикальной активности экстрактов растений».

Для исследования использовали надземные части 5 видов лекарственных растений (пижма обыкновенная, тысячелистник обыкновенный, полынь обыкновенная, зверобой продырявленный, клевер луговой). Они были собраны в период цветения 2005- 2006 гг. на территории Вышневолоцкого и Максатихинского районов Тверской области.

Для анализа антирадикальной активности получали экстракт 95 % этанолом в течение 30 мин при непрерывном встряхивании. Была предложена методика кинетического анализа активности экстрактивных веществ лекарственных растений в отношении стабильного радикала ДФПГ. Для сравнения антирадикальной активности экстрактов был предложен и теоретически обоснован кинетический параметр ( начальная скорость расходования ДФПГ при выбранных стандартных условиях). В исследуемом экстракте было достигнуто снижение скорости реакции ДФПГ с антиоксидантами экстрактов растений в среде этанола в 10- 150 раз путем введения кислот в реакционную среду. С увеличением силы кислоты в оптимуме ее концентрации, скорость реакции снижается. Введение более сильных кислот извне позволило исключить влияние органических кислот, экстрагируемых из растительного материала на результаты исследований.

 По данным исследования, в экстрактах растений количественное содержание веществ, активных в отношении ДФПГ, хорошо коррелирует с концентрацией фенольных соединений, что указывает на доминирующую роль последних в суммарной антирадикальнои активности растительных экстрактов. [5]

3.3.Изучение антирадикальной активности фруктовых соков.

Изучение проводили: Н. И. Белая, А. Н. Николаевский, Т. Н. Ивлева, О.Г. Шептура описали их в статье «Антирадикальная активность фруктовых соков в реакции с дифенилпикрилгидразилом».

Для получения соков использовали фрукты, которые являются традиционными при производстве соковой продукции и содержат значительное количество фенольных соединений. Соки прямого отжима получали в лаборатории из фруктов путем их механического измельчения, отделения жмыха и последующего фильтрования сока. Исследованию подвергались только свежеприготовленные соки полученные, в том числе из замороженных фруктов. Для сравнения изучались также соки, восстановленные из фруктовых концентратов заводского производства, получение которых предусматривает не только механическую, но и термическую обработку фруктов. Все исследуемые фруктовые соки стандартизировали по сухому остатку методом гравиметрии и общему количеству фенольных соединений методом перманганатометрического титрования.

Изучали антирадикальную активность компонентов фруктовых соков прямого отжима и восстановленных из фруктовых концентратов по отношению к радикалу 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила (ДФПГ).

Анализ полученных данных показал, что антирадикальная активность, количество фенольных соединений и сухого остатка, больше для апельсинового сока полученного из предварительно размороженного плода. Предварительное замораживание плодов приводит, повидимому, к разрушению структуры растительной ткани кристаллами льда, что способствует лучшему извлечению из нее веществ, в том числе фенольных соединений. Аналогичные результаты получены и для других соков, поэтому дальнейшие исследования проводили на соках, полученных из предварительно замороженных фруктов.

Соки из апельсина, грейпфрута и киви, содержащие в своем составе значительное количество фенольных соединений, а также витамина С, проявляют большую антирадикальную активность (Рис.15). Уменьшение количества фенольных соединений в составе лимонного, гранатового соков приводит к увеличению времени полупревращения ДФПГ в нерадикальную форму и соответственно к снижению антирадикальной активности этих соков. Менее реакционноспособны по отношению к ДФПГ фенолы соков клюквы и яблока. Проанализировав и сопоставив результаты исследования можно сделать вывод, что соки цитрусовых (апельсиновый, грейпфрутовый) в любом случае обладают наибольшей антирадикальной активностью. [1, 33]

Рис. 15. Апельсин, грейпфрут, киви, лимон, яблоко

Исследования активности фенольных соединений фруктовых соков по отношению к свободным радикалам позволяет получить первичную информацию об уровне их антиоксидантной активности, что открывает дополнительные возможности для создания новых соков продукции лечебно-профилактического назначения. [1]

3.4. Изучение антирадикальной активности дикоросов Северного Охотоморья.

Исследования дикоросов опубликованы в статье «Антирадикальная активность экстрактов из некоторых дикоросов Северного Охотоморья». Проводили исследования А. Г. Лапинский и В. В. Горбачев.

Плоды и ягоды дикоросов собраны  в период созревания (цветки иван-чая в период цветения) частью- в пятикилометровой прибрежной зоне Большого Магадана, частью- в континентальной (пос. Сеймчан).

Антирадикальной активности определяли в экстрактах из высушенного сырья при температуре 60 и 100 °С в течение 48 ч. Для экстракции и приготовления рабочих растворов использовался водный спирт этиловый, приготовленный смешением двух объемов 96% этилового спирта-ректификата и одного объема дистиллированной воды. Раститьное сырье гомогенизировали и экстагировали водным спиртом при соотношении сырья и экстрагента 1:100, соответственно, настаиванием в течение недели при периодическом встряхивании. Для определения антирадикальной активности экстрактов использовалась реакция обесцвечивания стабильно свободного радикала ДФПГ.

После проведения исследования определили, что экстракты из всех изученных свежих образцов (голубика, жимолость, иван-чай, княженика, смородина красная, рябина красноплодная, рябина желтоплодная, брусника, черника, шиповник) обладают существенно большей антирадикальной активностью, чем плоды черники. А в случае иван-чая, жимолости и шиповника- даже на порядок.

Так же исследовали антирадикальную ативность у прогретых образцов и выявили, что снижение антирадикальной активности было наименьшим у иван-чая. Возможно, это снижение связать с деградацией кислотных функций, в том числе обладающих антирадикальной активностью, поскольку рН водно спиртовых вытяжек из прогретых образцов был стабильно выше, чем у свежих ягод и возрастал с увеличением температуры сушки.

Подкисление экстракта из плодов черники, высушенных при 100 °С, 0,01 н хлористоводородной кислотой приводило к появлению окраски, характерной для экстракта из ягод, высушенных в более мягких условиях. Интересно, что при этом отмечалось и некоторое (в пределах 5 %) увеличение антирадикальнои активности, вероятно, вследствие подавления диссоциации фенольных гидроксилов.

Также интересно, что у некоторых  видов (брусника, голубика, рябина бузиннолистная, желтоплодная) антирадикальная активность экстрактов, прогретых до 100 °С, была несколько выше, чем у экстрактов проб, высушенных при 60 °С.

В результате проведенных исследований можно сделать вывод, что антирадикальная активность экстактов зависит не только от входящих в их состав веществ, но и от температуры сушки. [10]

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Глава 4. Изучение  гепатопротекторной, антитоксической и биологической активностей.

1. Изучение гепатопротекторного действия солянки холмовой.

Исследование гепатопротекторного действия солянки холмовой проводили: А. И. Венгеровский, А. Н. Мелентьева, В. Н. Буркова, а результаты опубликованы в статье « Гепатопротекторное и антиоксидантное действие экстракта солянки холмовой при парацетамоловом гепатите у крыс».

Солянка холмовая- Salsola collina, семейство- Chenopodiaceae, представляет собой однолетнее эндемичное растение, ареал которого охватывает юг европейской части России, Среднюю Азию, Казахстан, юг Сибири и Дальнего Востока. Жидкий экстракт солянки холмовой (лохеин) разрешен Министерством здравоохранения РФ в качестве биологически активной добавки к пище.

Солянку холмовую выращивали в опытном хозяйстве ООО "Биолит" в селе Алтайское (Алтайский край). Надземную часть растения собирали в период цветения-плодоношения. Хранение и переработку сырья проводили в условиях, исключающих потерю семян, так как семена содержат максимальное количество биологически активных соединений.

Для проведения исследования получали экстракт  методом противоточной многоступенчатой экстракции 25 % спиртом этиловым. Эксперименты проводили в осенне-зимний период на 70 беспородных крысах-самцах массой 200- 220 г, полученных из клиники лабораторных животных НИИ фармакологии Томского научного центра Сибирского отделения РАМН. Животных содержали в стандартных условиях вивария при естественном освещении, свободном доступе к воде и пище. Действие экстакта солянки холмовой сравнивали с действием силимарина (вводили контрольной группе животных).

В результате проведенных экспериментов  определено влияние гепатопротекторов растительного происхождения, содержащих полифенолы экстракта солянки холмовой и силимарина на метаболизм печени при ее поражении, вызванном у крыс парацетамолом. Оба гепатопротектора уменьшали проявления гепатотоксичности парацетамола, способствовали восстановлению основных функций печени.