Микробиология

Липиды входят в состав липопротеинового комплекса трехслойной клеточной мембраны. Главный липидный компонент паразитических микоплазм – холестерин. Он обладает свойством стабилизировать мембраны и придавать им эластичность, а также обеспечивает структурную целостность клеток, способствует проникновению жирных кислот и их утилизации, оказывает детоксирующее действие на жирные кислоты, лизирующие микоплазмы, и, наконец, служит энергетическим материалом. Белки микоплазм входят в состав цитоплазмы и мембран и состоят из 17 аминокислот. Гидрофобные компоненты мембранных белков микоплазм обладают выраженной антигенностью.

Микоплазмы размножаются в бесклеточных питательных средах, содержащих полноценный белок, холестерин, нуклеиновые кислоты, углеводы, витамины и минеральные соли.

Основа сред – триптический перевар бычьего сердца, перевар  Хоттингера, пептон Мартена, отвар сердечной  мышцы.

Микоплазмы можно культивировать в мартеновском МПБ и на МПА  с добавлением 15-20 % сыворотки крови  лошади или крупного рогатого скота  и 1 % глюкозы (рН 7,4-8,0). Широко используют среду Эдварда, основу которой составляет отвар сердца крупного рогатого скота с добавлением 1 % пептона, 20 % сыворотки лошади и 10 % дрожжевого экстракта, а также полужидкий и плотный агар Эдварда. Большое практическое значение получила среда: основа – перевар Хоттингера, 0,3 % поваренной соли, 0,5 % пептона, 0,5 % двузамещенного фосфорнокислого натрия, 0,5 % глюкозы и 20 % стерильной сыворотки лошади.

Рост в первичных  высевах наблюдается на 3-7-е сут, адаптированные к среде штаммы растут значительно быстрее. Для первичного выделения микоплазм можно использовать 5-7-суточные куриные эмбрионы, их заражают в желточный мешок. Гибель эмбрионов отмечается с 3-5-го пассажа. Получены также положительные результаты при заражении микоплазмами клеточных культур.

По характеру метаболизма  микоплазмы делятся на:

• ферментативно активные стеролозависимые  (истинные микоплазмы) – нуждаются для роста в холестерине и ферментируют с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, маннозу, фруктозу, крахмал и гликоген;
• ферментативно активные стеролонезависимые (ахолеплазмы) – также расщепляют с образованием кислоты приведенные выше углеводы, некоторые штаммы разлагают сахарозу и галактозу;
• ферментативно неактивные – восстанавливают тетразолевые соединения, окисляют лактат и глутанат, но не ферментируют углеводы.

Уреаплазмы синтезируют  уреазу и расщепляют мочевину.

 Функцию антигенов  у микоплазм выполняют липидные, полисахаридные и белковые компоненты, избирательная активность которых  зависит от вида и серовара микоплазм.

M. mycoides subsp. ьycoides и M. mycoides subsp. сapri продуцируют эндотоксические субстанции, которые известны под названием галактана и глюкана.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Род и вид	Хозяин	Заболевание; место выделения
M. mycoides subsp. mycoides	КРС	Контагиозная перипневмония
M. mycoides subsp. capri	Козы	Плевропневмония
M. bovigenitalium	КРС	Маститы, воспаление гениталий
M. bovis	КРС	Маститы, воспаление гениталий, пневмоартрит
M. bovirhinis	КРС	Бронхопневмония телят
M. dispar	КРС	Бронхопневмония, артриты
M. bovoculi	КРС	Конъюнктивиты
M. alcalescens	КРС	Маститы
M. agalactiae	Овцы, козы	Агалактия овец и коз
M. ovipneumoniae	Овцы, козы	При пневмонии из легких
U. urealyticum	КРС, овцы, козы	Хронические воспали-тельные  процессы уроге-нитальных органов. Па-тология плода. Пиело-нефриты. Выделяются из семенной жидкости бы-ков
A. laidlawii	КРС	Выделяется при респира-торных заболеваниях, урогенитальной патоло-гии, маститах

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

3. Виды диагностических препаратов. Принцип изготовления и контроль аллергенов.

 

Диагностические сыворотки  в условиях лабораторий применяют для постановки серологических реакций с целью  идентификации выделенных микроорганизмов  и обнаружения растворимых белков микробного происхождения. Готовят  их путем гипериммунизации кроликов или других животных микробными или вирусными антигенами, иногда клетками организма животных (эритроцитами). Используют агглютинирующие сыворотки (сальмонеллезные, колибактериозные, листериозные и др.), преципитирующие  (сибиреязвенная), гемолитические в РСК. Диагностические иммунные сыворотки часто метят флюорохромами и применяют для экспресс-диагностики инфекционных болезней (флюоресцирующая сальмонеллезная сыворотка, листериозная и др.). Из диагностических сывороток готовят иммуноглобулины (антирабический флюоресцирующий иммуноглобулин для диагностики бешенства).

Диагностические сыворотки  должны обладать строгой специфичностью и высокой чувствительностью.

Диагностические антигены используют для постановки серологических реакций, когда по известному антигену определяют наличие специфических антител в сыворотке крови больного животного. Биофабрики для лабораторий готовят единый бруцеллезный антиген для РСК, РА и РДСК, комплексный туберкулезный антиген для РСК, вибриозный антиген для РА, паратифозные антигены для РА, антигены для диагностики лептоспироза, типоспецифические ящурные антигены, сухой антиген из риккетсий Бернета для РСК и др. Биофабрики также готовят аллергены для аллергической диагностики больных животных (альттуберкулин для птиц, туберкулин сухой очищенный (ППД), маллеин, бруцеллин ВИЭВ, комплексный аллерген из атипичных микобактерий (КАМ) и др.). Выпускают также диагностические фаги (сибиреязвенный бактериофаг К-ВИЭВ, сибиреязвенный бактериофаг «Гама-МВА», стафилококковые фаги для типирования штаммов и др.), а также лечебно-профилактические фаги (бактериофаг против паратифа и колибактериоза телят, бактериофаг против пуллороза-тифа птиц и др.).

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

4. Ознакомьтесь и опишите работу ветеринарной лаборатории, обслуживающей ваш участок. Примите участие в лабораторной диагностике инфекционного заболевания. Опишите подробно порядок этого исследования и его результаты.

 

Основные задачи ветеринарной лаборатории: разработка и организация мероприятий  по предупреждению и ликвидации заболеваний в зоне деятельности лаборатории; проведение диагностических исследований и исследований кормов, воды, мяса, молока и других продуктов.

Кроме того, лаборатория проводит вирусологические, радиологические  исследования, осуществляет методическое руководство работой лабораторий ветеринарно-санитарной экспертизы рынков, а также оказывает помощь ветеринарным органам и учреждениям в разработке, организации и проведении необходимых ветеринарных мероприятий. На базе отделов ветеринарной лаборатории ежегодно проводят семинары, стажировки, проходят апробацию и широкие производственные испытания новых диагностикумов для диагностики бруцеллеза животных (РИД, РНГА), а также проходит контроль новых вакцин, рекомендованных Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода РФ для профилактики бруцеллеза и бешенства сельскохозяйственных животных.

За счет внедрения новейших методов  исследований и своевременной диагностики  оперативно проводятся противоэпизоотические  и организационно-хозяйственные  мероприятия в животноводстве, что позволило сократить заболеваемость и очаговость при хронических болезнях. Благодаря освоению биохимического метода исследований на трихинеллез повысилась выявляемость этой инвазии.

При проведении диагностики туберкулеза  крупного рогатого скота используется питательная среда ФАСТ-ЗЛ, благодаря этому значительно повысился уровень выявления болезней и в связи с этим сократилось количество неблагополучных пунктов.

Все исследования проводятся по определенным ГОСТам или методическим указаниям.

В ветеринарной лаборатории действует 14 отделов: бактериологический, серологический, вирусологический, паразитологический, патоморфологический, химико-токсикологический, биохимический, радиологический, противобруцел-лезная экспедиция, отдел по оценке эпизоотического состояния, отдел по диагностике и экспертизе, лептоспирозный, ихтиопатологический, отдел стандартизации и метрологии.

Специалисты отделов лаборатории  осуществляют диагностику инфекционных и паразитарных болезней животных, птиц, пушных зверей, рыб и пчел, выявляют нарушения обмена веществ в их организме, помогая тем самым специалистам хозяйств, фермерам, перерабатывающим предприятиям успешно осуществлять лечебно-профилактические мероприятия. В том числе, лаборатория проводит исследования кормов, что особенно актуально весной.

Ежегодно проводится вакцинация животных от самых распространенных и опасных  болезней согласно разработанным планам.

 

 

 

 

ВИД ИССЛЕДОВАНИЯ	ПОСУДА	КОЛИЧЕСТВО И  ХАРАКТЕРИСТИКА МАТЕРИАЛА	УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВКИ	СРОК ИСПОЛНЕНИЯ
Кала на дисбактериоз с определением чувствительности патогенной микрофлоры к антибиотикам и фагам	стерильная банка-15 мин. Обработка кипячением	1ст. ложка кала из  несоприкасающейся с землей части  каловых масс	холодильник- 30 часов; комнатная температура-3 часа	7 ДНЕЙ
Слизи на микрофлору с  определением чувствительности к антибиотикам и фагам	стерильная пробирка с транспортной средой и ватным тамп.	из предполагаемых мест поражений стерильным ватным тампоном	холодильник- до 4-х суток	7 ДНЕЙ
Хламидии Микоплазма Уреоплазма	стерильная пробирка с ватным тамп.	собрать выделения стерильным ватным тампоном	комнатная температура  до 48 часов	7 ДНЕЙ
Химическое исследование мочи (Общий анализ)	чистая банка	моча 40-50 мл.	Холодильник до 24 часов	1 ДЕНЬ
Определение в моче диастазы	чистая банка	моча 2-4 мл.	Холодильник до 24 часов	2 ДНЯ
Микроскопия кала	чистая банка	1ст. ложка кала из  несоприкасающейся с землей части  каловых масс	холодильник до 24 часов	1 ДЕНЬ
Исслед. кала на обн. стеркобилина,биллиру-бина, скрытой крови.	чистая банка	1ст. ложка кала из  несоприкасающейся с землей части  каловых масс	холодильник- до 20 часов	2 ДНЯ
На вирус чумы	стерильная пробирка с ватным тамп. и  2 мл. NaCl	Сухим тампоном собрать  конъюнктивальные истечения или  экссудат из носовой полости, опустить в пробирку добавить 2 мл NaCl и тщательно взболтать	комнатная температура-4 часа морозильная камера до 4 дней	1 ДЕНЬ
Овогельминтология кала	банка	1ст. ложка кала из  несоприкасающейся с землей части  каловых масс	холодильник   до 24 часов	1 ДЕНЬ
Соскобы: на демодекоз, саркоптоз, нотоедроз.	два предметных стеклышка	глубокий соскоб с  кровью с периферии пораженных участков	комнатная температура  до 24 часов	1 ДЕНЬ
На отодектоз	два предметных стеклышка	собрать ватным тампоном выделения из глубины ушных раковин	комнатная температура  до 24 часов	1 ДЕНЬ
На дерматофиты	Одноразовая пробирка	шерсть с пораженных участков кожи	комнатная температура  до 24 часов	2 ДНЯ
Определение концентрации гормонов (Т3; Т4, кортизол)	Чистая пробирка	2-5 мл. сыворотки	холодильник до 24 часов	7 ДНЕЙ
Цитология	обезжиренное предметное стекло	мазок на предметное стекло с предполагаемого места поражения	холодильник до 24 часов	7 ДНЕЙ
Гистология	банка с формалином	орган, кусочек органа или ткани. Опухоль или кусочек  опухоли.	холодильник до 3х дней	14 дней
Клинический анализ крови	проб. с ЕДТА	1 мл.	холодильник до 24 часов	2 ДНЯ

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

                        

Список использованной литературы

 

1. Ветеринарная микробиология и иммунология / Н. А. Радчук, Г.В. Дунаев, Н.М. Колычев – М.: Агропромиздат, 1991.

 

2. Микробиология / Н.Р. Асанов – М.: Агропромиздат, 1989.

 

3. Ветеринарная микробиология / П.А. Емельяненко – М.: Колос, 1982.

 

4. Ветеринарная иммунология / У.Д. Герберт – М.: Колос, 1974.

 

5. Инфекционные болезни животных / Д.Ф. Осидзе – М.: Агропромиздат, 1987.

 

6. Структура и функции антител. – М.: Мир, 1983.

 

7. Справочник по микозам и микотоксикозам сельскохозяйственных животных. – Киев: Урожай, 1982.

 

8. Микробиология с вирусологией и иммунологией / К.Д. Пяткин – М.: Мир, 1972.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Выполнила _____________________________                         30.09.2003