Автор: Пользователь скрыл имя, 09 Октября 2012 в 15:07, контрольная работа
1.Понятие об антителах. Физико-химические, антигенные, функциональные различия иммуноглобулинов
2.Характеристика возбудителей микоплазмозов КРС
3.Виды диагностических препаратов. Принцип изготовления и контроль аллергенов
4.Ознакомьтесь и опишите работу ветеринарной лаборатории, обслуживающей ваш участок. Примите участие в лабораторной диагностике инфекционного заболевания. Опишите подробно порядок этого исследования и его результаты
Понятие об антителах. Физико-химические,
антигенные, функциональные различия иммуноглобулинов…………………3
Характеристика возбудителей микоплазмозов
рогатого скота ……………………………………………………………………8
Виды диагностических препаратов.
Принцип изготовления и контроль аллергенов………………………………11
Ознакомьтесь и опишите работу ветеринарной лаборатории,
обслуживающей ваш участок. Примите участие в лабораторной
диагностике инфекционного заболевания. Опишите подробно
порядок этого исследования и его результаты………………………………..12
Список использованной литературы…………………………………………..14
Московская государственная академия ветеринарной
медицины и
биотехнологии им. К.И. Скрябина ______________________________
Кафедра микробиологии и иммунологии
Фроловой О.А., студентки
Проверил: ______________________________
антигенные, функциональные различия иммуноглобулинов…………………3
рогатого скота ………………………………………
Принцип изготовления и контроль аллергенов………………………………11
обслуживающей ваш участок. Примите участие в лабораторной
диагностике инфекционного заболевания. Опишите подробно
порядок этого исследования и его результаты………………………………..12
Антитела (иммуноглобулины) – продукты гуморального иммунного ответа, это глобулины, специфически реагирующие с антигеном, вызвавшим их образование.
Антитела являются важным специфическим фактором защиты организма против возбудителей болезней и генетически чужеродных веществ. Они образуются в организме в результате естественного инфицирования, вакцинации живыми или убитыми вакцинами, контакта лимфоидной системы с чужеродными клетками или тканями (трансплантаты) либо с собственными аутоантигенами.
По функциональным свойствам различают:
Также выделяют комплементсвязывающие антитела.
Антитела подразделяют на тепловые, которые хорошо вступают в реакцию взаимодействия при температуре 37 0С, и холодовые (криофильные), вступающие в реакцию при 4 0С.
По физическим свойствам, в частности, по подвижности в электрическом поле белки сыворотки крови разделяются на альбумины и три глобулиновые фракции – альфа, бета и гамма. При помощи электрофореза было установлено, что антитела имеются только в бета- и гамма-глобулиновых фракциях.
В результате центрифугирования антитела были разделены на две основные группы: 7S, небольшие молекулы антител, и 19S, большие молекулы антител. После электрофореза антитела 7S в основном обнаруживаются в гамма-глобулиновой фракции, а 19S – в бета-глобулиновой.
Также было установлено, что антитела имеют различное количество активных центров в молекуле, что определяет их валентность. В этой связи они были разделены на полные и неполные. Полные (двух или пятивалентные) антитела при взаимодействии с антигеном, на который они выработаны, дают визуально видимые реакции (агглютинации, лизиса, преципитации). Неполные (моновалентные, блокирующие) антитела при специфическом взаимодействии с гомологичным антигеном не дают видимого проявления серологической реакции, т.е. не могут агрегировать частицы в крупные конгломераты, а лишь блокируют их. Неполные антитела образуются независимо от полных антител и выполняют те же функции. Представлены они различными классами иммуноглобулинов. Для обнаружения неполных антител существуют специальные реакции – Кумбса, блокирующая проба.
В соответствии с Международной классификацией сывороточные белки, несущие «антительную» активность и называвшиеся ранее гамма-глобулинами, получили название иммуноглобулинов и символ Ig. Иммуноглобулины подразделяют на пять классов IgG, IgМ, IgА, IgD, IgЕ, в пределах каждого класса делятся на подклассы.
Иммуноглобулины - это сложные белковые образования, мономеры или полимеры. Молекулы иммуноглобулинов состоят из двух параллельных цепочек: 2H (две ''тяжелые'' цепочки) и 2L (две ''легкие'' цепочки), связанных между собой дисульфидными мостиками. Легкие цепи являются общими для всех классов и подклассов. Тяжелые цепи имеют характерные особенности строения у каждого класса (подкласса). Легкие цепи подразделены на два типа: κ (каппа) и λ (лямбда). Тяжелые цепи обозначаются: γ (гамма), μ (мю), α (альфа), δ (дельта) и ε (эпсилон). В молекуле иммуноглобулина различают два вида межцепьевых дисульфидных связей: между одноименными тяжелыми цепями и между легкими и тяжелыми цепями. В одной молекуле иммуноглобулина никогда не может быть два одинаковых типа цепей.
В структуре иммуноглобулина можно выделить: константные области, в них постоянная последовательность аминокислот; вариабельные части; гипервариабельные участки; шарнирные области - необходимы для изменения конформации, в них есть участки связывания белков системы комплемента. При обработке молекулы иммуноглобулина папаином он распадается на три фрагмента – два из них Fab-фрагменты (Fragment antigen - binding) и один Fc-фрагмент. Fab-Фрагмент обладает способностью связываться с антигеном, но не вызывает агглютинацию и преципитацию. С- концевой участок H- цепей служит для прикрепления к клеточному Fc- рецептору. Fc- фрагмент способен активировать систему комплемента, обеспечивает способность иммуноглобулина G проходить через биомемрану (проходит через фетоплацентарный барьер), определяет цитофильность, оказывает опсонизирующее действие на объекты фагоцитоза.
При всей специфичности антитела, образовавшиеся при иммунном ответе организма, неоднородны и отличаются друг от друга, т.е. они гетерогенны. Главной основой гетерогенности (разнообразия специфичностей) антител является уникальность их активных центров. Антитела гетерогенны по принадлежности к различным классам и подклассам, а также по физико-химическим и биологическим свойствам.
Благодаря наличию у антител активного центра они способны реагировать с антигеном. Активный центр – полость или щель, соответствующая пространственной конфигурации детерминантной группы антигена. Последняя же определяется последовательностью аминокислот вариабельных участков легких и тяжелых цепей антител. Активный центр, куда входит определенной формы и жесткости детерминантная группа, должен быть ей комплементарен, без чего не наступит феномен серологической специфичности. Молекула антитела связывается с детерминантой антигена не целиком, а лишь определенной частью, называемой активным центром. Предполагается, что антиген и антитела соединяют следующие силы: гидрофобное взаимодействие, водородные связи, кулоновы силы между группами ионов с противоположным зарядом, вандерваальсовы силы, которые действуют на очень близком расстоянии.
Активность связывания
антител с антигеном
Иммуноглобулины содержат три вида антигенных детерминант: изотипические, аллотипические и идиотипические. У каждого биологического вида тяжелые (5 классов) и легкие (2 типа) цепи иммуноглобулинов имеют определенные антигенные особенности. Одинаковые антигенные детерминанты для каждого представителя данного вида называют изотипическими. Вместе с тем имеются внутривидовые различия названных цепей иммуноглобулинов – аллотипы. Их признаки генетически детерминированы. Существуют различия между разными антителами, даже если они относятся к одному классу, подклассу и аллотипу. Эти различия названы идиотипами. Они характеризуют «индивидуальность» данного иммуноглобулина. Фактически идиотипы – антигенные детерминанты, которые отличают один V–домен от всех других.
У лошадей установлены IgМ, IgG и IgА, у крупного рогатого скота – IgG (два подкласса: G1 иG2), IgМ и IgА, у свиней, овец и коз – IgМ, IgG и IgА, у домашних птиц – IgМ, IgG и IgА.
Ig |
Субклассы |
Время полужизни |
Характеристика |
G |
G1, G2, G3, G4 |
18-23 дня |
Мол. масса 160000, константа седиментации 7S. В сыворотке крови содержится в самой высокой концентрации (в среднем 12 г/л) и составляет 70-85 % всех Ig, есть также в тканевых жидкостях, двухвалентен, образует с поливалентными антигенами сетевую структуру, вызывает преципитацию растворимых антигенов. Принимает участие в реакции агглютинации и опсонизации корпускулярных антигенов. Для лизиса антигена необходимо связывание молекулой IgG комплемента. IgG играет ведущую роль в защите от многих вирусных и бактериальных инфекций (оспа, бешенство, столбняк), обладает выраженными свойствами нейтрализации токсинов, выдерживает нагревание при 75 0С 30 минут, проходит через фетоплацентарный барьер. |
М |
М1, М2, М3 |
5-6,5 дней |
Мол. масса 950000, константа седиментации 19S, около 6% всех Ig. Находится преимущественно в плазме крови, средняя концентрация в сыворотке крови человека 1,0 г/л, при инфекционных заболеваниях количество его значительно повышается. Функционально пятивалентен, первым появляется после заражения или вакцинации животного. Обладает выраженной способностью агглютинировать, преципитировать или лизировать антигены, а также связывать комплемент. Не участвует в аллергических реакциях, не переходит через плаценту. |
А |
сывороточный |
5 дней |
Мол. масса 170000, константа седиментации 7S, мономер, концентрация в сыворотки крови 15-20 % общего количества Ig, не обладает способностью преципитировать растворимые антигены, не связывает комплемент по классическому пути, принимает участие в реакции нейтрализации токсинов, термоустойчив, синтезируется в селезенке, лимфатических узлах и в слизистых оболочках и поступает в секреты – слюну, слезную жидкость, бронхиальный секрет, молозиво. |
секреторный (SIgA) |
Мол. масса 380000, константа седиментации 11S и 15S, полимер, чаще димер. Наличие добавочного структурного компонента, отсутствующего в сывороточном; синтезируется в слизистых оболочках. Мастная защита слизистых оболочек. В кишечном тракте подавляет бактериальную адгезию, нейтрализует вирусы. SIgA образуется в результате ассоциации димерной формы IgA с особым белком, названным секреторным компонентом, находящимся в собственном слое слизистой оболочки, проходит базальную мембрану и проникает в эпителиальную клетку, где соединяется с секреторным компонентом, после чего происходит выход синтезированного SigA на поверхность эпителиального покрова кишечника. | ||
D |
- |
2,8 дня |
Мол. масса 160000, константа седиментации 7S, концентрация в сыворотке крови человека не превышает 1 % от общего количества Ig. Является одним из основных Ig, входящих в состав рецепторов В-лимфоцитов, термостабилен, может активировать комплемент по альтернативному пути, обладает антивирусной активностью, не связывается с тканями. Биологическая функция еще не совсем ясна. |
Е |
- |
2,4 дня |
Мол. масса 190000, константа седиментации 8,5S, концентрация в сыворотке крови в среднем 0,25 мг/л, мономер. Термолабилен, инактивируется нагреванием при 56 0С в течение 1 ч, не связывает комплемента, быстро и прочно связывается с клетками тканей, с тканевыми базофилами, принимает участие в реакции гиперчувствительности немедленного типа. При аллергических заболеваниях концентрация IgЕ в сыворотке крови значительно увеличивается. Считают, что IgЕ играет защитную роль при гельминтозных и протозойных заболеваниях, в частности способствует усилению фагоцитарной активности макрофагов и эозинофилов. |
Микоплазмы – мельчайшие свободноживущие прокариоты без ригидной клеточной стенки. Функцию клеточной стенки у них выполняет цитоплазматическая мембрана.
Микоплазмы обладают полиморфизмом клеток, состоящих из ветвистых, шаровидных, разной оптической плотности особей и мельчайших репродуцирующих элементов размером 100-450 нм; имеют наружную трехслойную цитоплазматическую мембрану, в которой сосредоточено большинство биосинтетических и регуляторных функций; геном представлен одной молекулой ДНК, формирующей кольцевую хромосому, реплицирующуюся полуконсервативным путем; нуклеотидный состав ДНК характеризуется низким содержанием гуанина и цитозина; имеют множественный путь репродукции: почкование, сегментацию ветвистых и цепочных форм, элементарные тельца, простое деление; нуждаются для роста в стеролах (за исключением ахолеплазм) и нативном белке; на плотных средах формируют колонии с приподнятым центром, напоминающие яичницу-глазунью; нечувствительны к пенициллинам и другим антибиотикам, угнетающим синтез пептидогликанов клеточной стенки бактерий; вызывают гемадсорбцию, гемагглютинацию и лизис эритроцитов различного происхождения; имеют четко выраженные антигенные различия.
Микоплазмы отнесены к отделу Tenericutes, классу Mollicutes, порядку Mycoplasmatales, который состоит из трех семейств: микоплазм (Mycoplasmataceae), ахолеплазм (Acholeplasmataceae) и спироплазм (Spiroplasmataceae).
Семейство микоплазм подразделяется на два рода: микоплазм (Mycoplasma) и уреаплазм (Ureaplasma).
Микоплазмы исключительно полиморфные микроорганизмы.
В мазках из пораженных органов и из культур они имеют форму подковообразных, сферических, нитевидных, овоидных палочковидных или напоминающих кольца образований.
Микоплазмы грамотрицательны, хорошо окрашиваются по Романовскому-Гимзе, для витальной окраски применяют специальный метод Динеса.
Клетки микоплазм снаружи имеют трехслойную мембрану толщиной 7,5-10 нм; внутри содержится цитоплазма и дифференцированный нуклеоид, представленный замкнутой в кольцо молекулой ДНК, формирующей одну хромосому. В цитоплазме находятся рибосомы, их размер соответствует величине рибосом бактерий. У микоплазм также обнаружены внутрицитоплазматические мембранные структуры, выполняющие функцию субстрата синтеза энергии, и отсутствуют типичные мезосомы.