Ветеринарная вирусология

Болезнь протекает  остро. Клинические признаки ее в  основном одинаковы у всех животных, но наиболее типичны они у собак, у которых может наблюдаться  как буйное, так и тихое (паралитическое) течение болезни. У крупного рогатого скота бешенство может протекать  атипично (потеря аппетита, атония рубца, паралич глотки, слюнотечение). Стадии возбуждения может не быть. Патологоанатомические  изменения не специфичны. У мясоедных (в основном у собак) в желудке  можно обнаружить инородные предметы.

Вирус бешенства  обладает выраженной нейропробазией. Проникая с периферии (место укуса) по нервным стволам в центральную (нервную систему центростремительно, он распространяется в организме  центробежно по периферическим нервам и попадает в разные органы, включая  слюнные железы.

Вирус относится  к семейству Rhabdoviridae, роду Lyssavirus. Вирионы  имеют форму стержня с обрубленным  концом. Вирион вируса - РНК-содержащий со спиральным типом симметрии, имеет  липопротеид-ную оболочку. Низкие температуры  консервируют вирус. Температура 60°С убивает  его через 5-10 мин, солнечный свет - за 5-7 дней. Растворы формалина, фенола, соляной кислоты (5%-ные) инактивируют вирус за 5-10 мин.

Вирион вируса бешенства содержит гликопротеидный (наружный) и нуклеокапсидный (внутренний) антигены. Гликопротеидмый антиген  индуцирует образование вируснейтрализующих  антител, а нуклеокапсидный - комплемептсвязывающих  и преципитирующих антител.

Эпизоотические  штаммы вируса бешенства в иммунобиологическом  отношении родственны, но различаются  по вирулентности.

В организме  вирус локализуется главным образом  в центральной нервной системе, а также в слюнных железах  и слюне. Культивируется на мышах, кроликах, морских свинках и других животных, а также в первичных культурах  клеток (почки сирийского хомячка, эмбриона овец, телят и др.) и перевиваемых клетках (ВНК-21, КЭМ-1 и др.). Размножение  вируса в культурах клеток не всегда проявляется ЦПД. К вирусу бешенства  после предварительной адаптации  восприимчивы и куриные эмбрионы. Вирус индуцирует образование цитоплазматических телец-включений, которые чаще всего  обнаруживают в клетках аммонова рога, мозжечка, коры головного мозга.

Источником инфекции являются больные животные. Они передают вирус во время укуса. Плотоядные животные могут заражаться при поедании головного и спинного мозга погибших от бешенства животных. Доказана возможность  заражения бешенством аэрогенным путем (в местах, где имеются летучие  мыши). До 1960-х годов основным источником распространения бешенства были собаки и кошки, позднее лисицы, волки, корсаки и другие дикие животные.

Диагноз на бешенство  ставят на основании эпизоотологических, клинических данных и результатов  лабораторных исследований, имеющих  решающее значение.

При работе с  больными животными и инфекционным материалом необходимо строго соблюдать  меры личной безопасности: надевать резиновые  перчатки, халаты с нарукавниками, резиновый  или полиэтиленовый фартук, резиновые  сапоги, защитные очки, защитную маску  на лицо.

Вскрывать подозрительных та заболевание бешенством животных в полевых условиях запрещено.

Лабораторная  диагностика. Она включает: обнаружение  вирусного антигена в РИФ и  РДП, телец Бабеша - Негри и биопробу на белых мышатах.

Методика постановки РИФ. На обезжиренных предметных стеклах  готовят тонкие отпечатки или  мазки из различных отделов головного  мозга левой и правой стороны (аммонов рог, кора полушарий, мозжечок и продолговатый мозг). Готовят  не менее двух препаратов каждого  отдела мозга. Можно также исследовать  спинной мозг, подчелюстные слюнные  железы. Для контроля делают препараты  из мозга здорового животного (обычно белой мыши).

Препараты высушивают на воздухе, фиксируют в охлажденном  ацетоне (минус 15-20 °С) от 4 до 12 ч, высушивают на воздухе, наносят флуоресцирующий  гамма-глобулин, помещают во влажную  камеру при 37 °С на 25-30 мин, затем тщательно  промывают физиологическим раствором  или фосфатным буфером с рН 7,4, споласкивают дистиллированной водой, высушивают на воздухе, наносят нефлуоресцирующее  иммерсионное масло и просматривают  под люминесцентным микроскопом. В препаратах, содержащих антиген вируса бешенства, наблюдаются разной величины и формы флуоресцирующие желто-зеленым цветом гранулы в нейронах, но чаще вне клеток. В контроле подобного свечения не должно быть, нервная ткань обычно светится тусклым сероватым или зеленоватым цветом. Интенсивность свечения оценивают в крестах. Отрицательным считают результат при отсутствии специфической флуоресценции.

Материал от животных, вакцинированных против бешенства, нельзя исследовать в РИФ в  течение 3 мес после прививки, так  как может быть флуоресценция  антигена вакцинного вируса.

В РИФ не подлежат исследованию ткани, консервированные глицерином, формалином, спиртом и  т. д., а также материал, имеющий  признаки даже незначительного загнивания.

РДП в агаровом геле. Метод основан на свойстве антител и антигенов диффундировать в агаровом геле и при встрече  образовывать видимые визуально  линии преципитации (комплекс антиген ++ антитело). Применяют для обнаружения  антигена в мозге животных, павших от уличного вируса бешенства, или при  экспериментальной инфекции (биопроба).

Реакцию ставят на предметных стеклах, на которые наливают 2,5-3 мл расплавленного 1,5%-ного раствора агара. После застывания в агаре  делают лунки по трафарету диаметром 4-5 мм, помещенному под предметное стекло с агаром. Агаровые столбики вынимают ученическим пером. Лунки  в агаре заполняют компонентами по схеме.

От крупных  животных исследуют все отделы головного  мозга (левой и правой стороны), от средних (крысы, хомяки и др.) - какие-либо три отдела мозга, у мышей - весь мозг. С помощью пинцета из мозга  готовят пастообразную массу, которую  и помещают в соответствующие  лунки.

Контроли с  положительным и отрицательным  антигенами ставят на отдельном стекле по тому же трафарету.

После заполнения лунок компонентами препараты помещают во влажную камеру и ставят в термостат  при 37 °С на 6 ч, затем при комнатной  температуре на 18 ч. Учет результатов  ведут в течение 48 ч.

Реакцию считают  положительной при появлении  одной или 2-3 линий преципитации любой интенсивности между лунками, содержащими суспензию мозга  и антирабический гамма-глобулин.

Бактериальная нестерильность и загнивание мозга  не препятствуют использованию его  для РДП. Материал, консервированный глицерином, формалином и другими  средствами, для РДП не пригоден.

Выявление телец  Бабеша - Негри. На предметных стеклах  делают тонкие мазки или отпечатки  из всех отделов головного мозга (как для РИФ), не менее двух препаратов с каждого отдела мозга, окрашивают по одному из методов (по Селлерсу, Муромцеву, Манну, Ленцу и т.д.).

Пример окраски  по Селлерсу: на свежий, невысохший препарат наносят краситель, покрывая им весь препарат, выдерживают 10-30 с и смывают  фосфатным буфером (рН 7,0-7,5), высушивают в вертикальном положении при  комнатной температуре (в затемненном  месте) и просматривают под микроскопом  с масляной иммерсией.

Положительным результатом считают наличие  телец Бабеша - Негри - четко очерченных овальных или продолговатых гранулированных  образований розово-красного цвета, расположенных в цитоплазме клеток или вне их.

Данный метод  имеет диагностическое значение только при обнаружении типичных специфических включений.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Акбаев М.Ш., Водянов  А.А., Косминков Н.Е. и др. Паразитология  и инвазионные болезни животных: Учебник для вузов (под ред. док.вет.наук, проф. Акбаева М.Ш.). - М., 2001.

Лютинский С.И., Степин В.С. Практикум по патологической физиологии сельскохозяйственных животных. Учебник. - М., 2001.

Основы ветеринарии. - М., 2001.

Троценко Н.И., Белоусова Н.И., Преображенская Э.А. Практикум по ветеринарной вирусологии. - М., 1989. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Оспа Версия для печати 

Оспа (Variola) —  инфекционная контагиозная болезнь, характеризующаяся  лихорадкой и папулезно-пустулезной  сыпью на коже и слизистых оболочках. 

Возбудители болезни  принадлежат к различным родам  и видам вирусов семейства  оспы (Poxviridae). Самостоятельными видами являются вирусы: натуральной юспы коров, осповакцины (род Orthopoxvirus), натуральной  оспы овец, коз (род Carpipoxvirus), свиней (род Suipoxvirus), птиц (род Avipoxvirus) с тремя  основными видами (возбудители оспы кур, голубей и канареек). 

Возбудители оспы у различных видов животных морфологически сходны. Это ДНК-содержащие вирусы, характеризующиеся относительно большими размерами (170 — 350 нм), эпителиотропностью и способностью образовывать в клетках  элементарные округлые включения (тельца Пашена, Гварниели, Боллингера), видимые  з световом микроскопе после окраски  по Моро-зову Хотя и имеется филогенети--еское  родство между возбудителями  оспы у различных видов животных, спектр « патогенности неодинаков и  иммуногенные связи сохранились  не во всех случаях. Вирусы натуральной  оспы овец, коз, свиней и птиц патогенны  только для соответствующего вида, и в естественных условиях каждый из них вызывает самостоятельную (оригинальную) оспу. Вирусы натуральной оспы коров  и осповакцины имеют широкий  спектр патогенности, включая крупный  рогатый скот, буйволов, ло-ладей, ослов, мулов, верблюдов, кроликов, обезьян  и человека. 

Близкие иммунологические связи сохранились только между  двумя видами ви-гчсов — осповакцины  и коровьей оспы, тогда как остальные  возбудители совершенно газличны в  антигенном и иммуногенном отношении. Виды оспенных вирусов птиц антигенно  близки лишь между собой. 

Каждый вид  возбудителя оспы характеризуется  определенной инфекционностью г  отноше-нии культуры клеток и куриных  эмбрионов. Репродукция оспенных вирусов "риводит к появлению характерных  патологических изменений в хориоалантоисной • сюлочке эмбриона, а в культуре клеток — к выраженному ЦПД. Вирусы натуральной оспы овец, коз и свиней трудно адаптировать к искусственным  средам 

Устойчивость  оспенных вирусов во внешней среде  сравнительно высокая. Эчи могут  со-хранять жизнеспособность в сухих  корочках оспин до 1 '/2 лет- Замо-r-живание  консервирует ви-русы. В овчарнях вирус  оспы овец сохраняется более 6 мес, €i пастбищах и в шерсти переболевших животных — свыше 2 мес. Вирусы оспы "ыстро погибают при гниении. Они  очень чувствительны к высокой  температуре, , отнечным лучам и кислотам; кипячение убивает их моментально, 70 °С — за 5 мин, r-слая среда (рН 3,0 —3,6) —в течение часа. Растворы серной, соляной  и карболовой г слот (2 — 5 %-ные), формальдегида  и хлорамина (1 %-ные), едкого натра (3 %-ный) «активируют возбудителя в  течение часа. Биотермическое обеззараживание  инфици-г- ванного навоза (помета) наступает  через 28 дней. 

Эпизоотологические  данные. Оспой болеют почти все  виды млекопитающих животных и птиц. Но в связи со сложностью этиологической структуры оспы у животных и способностью каждого вида возбудителя вызывать самостоятельную болезнь анализ эпизоотического процесса необходимо вести с учетом вида вируса, вызвавшего конкретную вспышку оспы. 

В естественных условиях крупный рогатый скот, буйволы, лошади, ослы, мулы, верблюды и кролики  болеют оспой, вызванной вирусами натуральной  оспы коров и осповакцины. Оспу у  свиней вызывают два вида вирусов  — натуральный свиной и осповакцины. Овцы восприимчивы только к натуральному вирусу оспы овец, козы — к натуральному вирусу оспы коз; куры, индейки, голуби, цесарки, фазаны, попугаи, канарейки  и другие певчие птицы из отряда воробьиных — к оригинальным птичьим  оспенным вирусам. С учетом видового спектра патогенности возбудителей оспы в эпизоотический процесс при  конкретной вспышке болезни могут  вовлекаться лишь соот-ветствующие  восприимчивые виды животных, что  является важной эпизоотологической особенностью данной болезни.

Источником возбудителя  оспы являются больные животные и  вирусоносители в инкубаци-онном  периоде и после клинического выздоровления. 

Из организма  больных животных вирус выделяется с истечениями из носа и глаз, со слюной и с оспенными корочками. Факторами передачи могут быть предметы ухода, корма, подстилка, транспорт, трупы, кожи, шерсть, перья, пух и пр. Основные пути заражения животных — контактный, алиментарный и респираторный. Болезнь  особенно быстро распространяется при  совместном содержании больных и  здоровых животных. Возможна передача вируса кровососущими насекомыми, в  организме которых возбудитель  может выживать до 100 дней, а также  через молоко и плаценту матерей  во время беременности. Вирус оспы кур может находиться в содержимом яйца и на скорлупе.