Иммуноферментная диагностика вирусных гепатитов

4.3 HbсAg; anti-HbсAg.

      Антиген Hbс выявляется как в частицах Дейна, так и в ядрах пораженных гепатоцитов. В сыворотке и в плазме крови HbсAg в свободном виде не определяется. Для обнаружения HbсAg и соответствующих ему антител применяют антитела, меченые пероксидазой. В крови больного гепатитом В очень быстро появляются anti-Hbс, выявление которых имеет важное диагностическое значение. Аnti-Hbс класса IgM обнаруживаются в высоких титрах уже в начале острой фазы заболевания. Их выявление является убедительным критерием диагностики гепатита В, особенно при отрицательных результатах HbsAg. Данные антитела присутствуют в крови больного в течение нескольких месяцев, а затем исчезают, что рассматривают как признак очищения организма от вируса гепатита В. В период реконвалесценции выявляются anti-Hbс класса IgG совместно с anti-Hbs и anti-Hbе. Однако, довольно часто наличие их является единственным показателем инфекции в прошлом.

      В большинстве случаев в период острой стадии гепатита В содержание anti-Hbс IgM  значительно повышено. В случае незначительного повышения уровня  anti-Hbс IgM  , хронический гепатит может быть подтвержден при получении положительных результатов в тестах на выявление HbsAg и HbеAg.

      Первым  признаком возникновения иммунологической реакции на острую инфекцию вирусом  гепатита В, вскоре после появления  в сыворотке крови поверхностных  антигенов (HbsAg и HbеAg), но еще до появления антител к ним (anti-Hbs и anti-Hbе), является выработка антител к HbсAg. Данные  антитела можно обнаружить после исчезновения HbsAg и HbеAg, часто пожизненно. При отсутствии HbsAg или anti-Hbs антител присутствие anti-Hbс антител может служить единственным серологическим маркеров перенесенного вирусного гепатита В как потенциальной инфицированности крови.

     Около 10% случаев заболевания ВГВ выявляются только при исследовании на anti-Hbс антитела. Кроме того, определение anti-Hbс антител можно использовать при дифференциальной диагностике гепатитов А и В, и в сочетании с определением повышенной активности аланинаминотрансферазы в качестве замещающего маркера на гепатит С. 

5. Маркеры вирусного  гепатита С.

      Гепатит С вызывается вирусом (HCV), не имеющим серологических связей с вирусными гепатитами А и В. Вирус определяется как в сыворотке крови, так и в экстрактах печени человека и имеет размеры от 22 до 60 нм. Удельный вес гепатита С по данным разных авторов составляет 10-30% общей заболеваемости вирусными гепатитами с периодическим обострением процесса.

      В настоящее время считается, что  диагноз гепатита С может быть правомочным при отсутствии в  крови больного HbsAg, anti-Hbs IgM, anti-Hbс IgM, anti-HАV IgM, нарастания титра anti-Hbs IgG, anti-HАV IgG (если эти антитела имелись до заболевания). Клинически гепатит С протекает более легко, чем гепатит В. Инкубационный период составляет 30-40 суток. Течение заболевания в основном легкое (за исключением беременных) и заканчивается полным выздоровлением. Однако, показано, что почти у 50% пациентов болезнь принимает хроническое течение.

      В отличие от гепатита В, при исследовании гепатита С методом ИФА обнаруживаются только антитела IgM и IgG, так как антигены в крови находятся на грани чувствительности метода. Они могут быть определены в биоптатах печени иммуногистохимическим методом.

      Положительный результат анализа ИФА подтверждает  наличие инфицированности гепатитом  С. Образцы сыворотки, взятой на исследование, допускается хранить не более 5 суток при температуре +4⁰С. Не допускается многократное замораживание и размораживание сыворотки. В образце не должно выявляться выраженной гиперлипидемии и гемолиза.

      Острая  фаза гепатита С клинически отличима от других вирусных гепатитов. Желтуха  является хорошим диагностическим признаком, а длительная циркуляция anti-HСV IgM (более 2 мес.) – плохим, свидетельствующей о возможной хронизации процесса.

      Латентная форма соответствует хроническому течению инфекции с развитием  клинически манифестного хронического гепатита В. В латентной фазе anti-HСV IgM не обнаруживается, либо обнаруживается в низких концентрациях в связи с волнообразностью наработки антител.

        Фаза реактивации соответствует  хронической стадии гепатита  С с последующим развитием  в цирроз печени и гепатокарциному. Основным критерием оценки хронического гепатита С является динамический контроль за anti-HСV IgM, так как в фазу обострений концентрация этих антител всегда увеличивается.

      Отличительной особенностью гепатита С является высокая  летальность, особенно среди беременных женщин, преимущественно в III триместре, и достигает 20-40% и более. Поэтому выявление инфицирования вирусом гепатита С приобретает важное диагностическое значение. 

6. Маркеры вирусного  гепатита D.

      Вирус гепатита D (дельта-гепатит, HDV) по своим свойствам наиболее близок к вироидам и сателлитным вирусам растений. Он характеризуется сферической формой частиц и размером 35-37 нм в диаметре. Вирус гепатита D является дефектным вирусом, что проявляется в его зависимости от вируса помощника (HВV). Последний представляет HDV свой суперкапсид вместе с его главным компонентом – HbsAg. Исследования показали, что антиген гепатита D (HDAg) представляет собой белок, стабильный к нагреванию, кислотам, нуклеазам, гликозидам.

      Заражение гепатитом D происходит только при непосредственном попадании вируса в кровь, гораздо реже имеет место вертикальная передача от матери к ребенку. Продолжительность инкубационного периода колеблется от 3 до 7 недель.

      Так же как и при других гепатитах, большое значение для постановки диагноза и контроля за течением заболевания имеют серологические маркеры инфицирования. К ним относят: HDAg, anti-HDV IgM, anti-HDV IgG и РНК- HDV.

      Хроническая HDV-инфекция характеризуется высоким титром HDAg (более 1:5000). Активная репликация HDAg коррелирует с наличием HDAg в печени и anti-HDV IgM в сыворотке.

      Выявление дельта-инфекции является плохим прогностическим  признаком, свидетельствующим о  возможном быстром исходе заболевания  в цирроз печени.

      При суперинфекции в остром периоде заболевания HDAg выявляется в сыворотке кратковременно, а в некоторых случаях вовсе не обнаруживается, хотя результаты исследования гепатоцитов свидетельствуют о длительном его синтезе. В остром периоде заболевания идентифицируют также anti-HDV IgM. Аnti-HDV IgG могут длительно обнаруживаться в периоде реконвалесценции и на протяжении нескольких лет в процессе хронического гепатита.

      Чрезвычайно важное диагностическое значение приобретает  тот факт, что у больных с  хроническим гепатитом D чаще регистрируются более тяжелые поражения печени. 
 
 
 
 

Список  литературы:

1. Таранов А.Г. Диагностические тест-системы. Радиоиммунный и иммуноферментный методы диагностики. М.: Мокеев, 2002.
2. Таранов А.Г. Лабораторная диагностика. Радиоиммунный и иммуноферментный методы анализа. Новосибирск: Символ, 1995.
3. Гользанд И.В., Благословенский Г.С. Хронический гепатит. М.: Медицина, 1978.
4. Фарбер Н.А., Мартынов К.А. Вирусные гепатиты. М.: Медицина, 1990.